Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis efektivitas penggunaan ekstrak lempuyang (Zingiber zerumbet) sebagai bahan anestesi dalam transportasi benih ikan nila (Oreochromis ni/oticus) dengan mempertimbangkan variasi ukuran benih, kepadatan, dan lama waktu transportasi. Penelitian dilaksanakan pada bulan Juli hingga Agustus 2023 di Laboratorium Basah Balai Karantina Ikan, Pengendalian Mutu, dan Keamanan Hasil Perikanan Balikpapan (BKIPM Balikpapan) untuk uji transportasi (Tahap I), serta di perumahan Green Hell Samarinda untuk pemeliharaan ikan selama 30 hari pasca transportasi (Tahap II). Metode penelitian dilakukan dalam dua tahap: Tahap I mencakup uji transportasi dengan penambahan ekstrak Z. zerumbet dosis 5 rnL/L, sementara Tahap Il melibatkan pemeliharaan benih selama 30 hari setelah transportasi. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak lempuyang efektif dalam meningkatkan efisiensi transportasi benih ikan nila, dengan peningkatan kepadatan hingga 145 ekor/L selama 15 jam tanpa menyebabkan stres pada ikan. Pemberian ekstrakjuga menghasilkan kadar glukosa, hematokrit, dan hemoglobin yang tetap normal. Selain itu, penggunaan ekstrak lempuyang sebagai anestesi alami terbukti menekan biaya transportasi, meningkatkan kelangsungan hidup (SR), serta memacu pertumbuhan ikan nila pasca transportasi. Pada tahap pemeliharaan selama 30 hari, benih ikan menunjukkan pertumbuhan panjang yang baik, merespon normal terhadap pakan, serta memiliki total cemaran bakteri yang tidak melewati ambang batas yang ditetapkan, sehingga ikan layak untuk dikonsumsi. Penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak Z. zerumbet dapat digunakan sebagai alternatif anestesi alarni yang mendukung ekoefisiensi dalam proses transportasi dan pemeliharaan ikan nila.